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液相操作中需要注意的小细节

浏览次数: 日期:2022年4月27日 15:32
液相操作中,有一些小细节上的误操作在精益求精的实验室人看来是要尽可能避免的,细节虽小,影响很大。下面我们一起来看看!
加入有机相之后再测量流动相的PH值
作为液相色谱的基础,流动相的各项参数是保障实验质量的重中之重,特别是PH值。通常情况下对流动相PH值的测量是测量水相中的PH值参数,而在加入有机相后PH测量的PH值是会产生误差的。因为每一次加入的有机相并不能保证完全的同质同量,从而影响实验的准确度。
测量流动相的PH值,是测量水相中的PH值参数。有机相加入之后PH值参数的测量就和之前有误差。
缓冲盐使用不当
在流动相中,加入缓冲盐可以控制和修正流动相中的PH值变化。样品的机制,空气中的CO2等气体以及水中的杂质都能够造成流动相PH值变化进而影响样品的保留、峰形、峰面积参数。而每一种缓冲盐都只能在一定的PH值范围内提供了最佳的pH稳定性。而在这个范围外,该缓冲盐在抵抗pH值变化方面是无效的。所以需要在流动相中加入合适的缓冲盐,要么在正确的范围内使用缓冲盐,要么选择一个能够完全覆盖所需pH值的缓冲盐。
最后,缓冲盐的添加也是具有一定的要求的,如果将水相的缓冲溶液加入到有机相中,会大大增加缓冲盐析出的风险。缓冲盐的析出在初期可能并不明显,但会对仪器的各个部件都会产生一定影响。长此以往不仅会导致实验结果不准确,更会有可能导致仪器损伤甚至损坏。
直接用纯有机溶剂冲系统
如果之前的方法在B通道使用缓冲溶液,而这次没有经过调查就直接在B通道使用了纯的有机溶剂,那么就会造成该通道缓冲盐析出、出现堵塞等风险。
仅使用超声来给流动相脱气
超声脱气有一定的脱气作用,但完全脱气的效果并不理想。
所以在此建议使用真空脱气机进行在线脱气。
梯度洗脱时从流动相比例从0%开始
现在的液相色谱能够非常高效的进行在线脱气和流动相混合。但是将梯度洗脱比例从0%开始,会有比较大的出现气泡和沉淀的风险。
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该资讯的关键词为:液相操作